微生物限度檢查的概念和意義

　　1、微生物限度檢查的概念

　　微生物限度檢查法系檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的

　　方法。檢查項目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。

　　2、微生物限度檢查的意義

　　(1)藥品染菌對使用者的潛在危害

　　藥品中染菌數(shù)量愈高，其中所含致病菌的幾率愈高，這是造成藥源性感染疾病的直接原因。藥品染菌還可使其產(chǎn)生霉變、酸敗等理化性質(zhì)改變造成藥品失效、變質(zhì)，甚至產(chǎn)生毒素，危害使用者的健康。為保證藥品質(zhì)量，必須對微生物污染進(jìn)行必要的控制和檢驗。

　　(2)藥品染菌反映藥品生產(chǎn)工藝的科學(xué)性、合理性及質(zhì)量管理水平

　　微生物限度檢查的各項數(shù)據(jù)，是對藥品生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)環(huán)境、質(zhì)量管理及人員素質(zhì)的綜合評價依據(jù)之只有優(yōu)良的GMP企業(yè)，才能提供優(yōu)質(zhì)的醫(yī)藥產(chǎn)品，凡工藝條件、生產(chǎn)管理水平、生產(chǎn)人員素質(zhì)差，不注意文明生產(chǎn)的單位和企業(yè)，其生產(chǎn)的藥品，染菌必然嚴(yán)重，不合格率高。

　　藥品微生物限度檢查的特殊性和基本條件

　　1、藥品微生物限度檢查的特殊性

　　(1)活體細(xì)胞

　　(2)分布不勻

　　(3)多數(shù)處于受損狀態(tài)

　　(4)生境復(fù)雜

　　2、藥品微生物限度檢查的基本條件

　　由于污染菌在藥品中的不穩(wěn)定性和諸多影響因素，為真實地反映藥品的污染狀況，除采用準(zhǔn)確可靠的方法和對檢驗結(jié)果的正確判斷外，尤須注意以下幾項基本條件:

　　1)使用符合規(guī)定的培養(yǎng)基

　　使用符合規(guī)定的培養(yǎng)基是限度檢查的最基礎(chǔ)保障。而培養(yǎng)基的適用性檢查尤為重要，2010版藥典明確規(guī)定，實驗用培養(yǎng)基必須經(jīng)過適用性檢查，結(jié)果符合規(guī)定方可使用。

　　2)保持供檢樣品的原污染狀態(tài)

　　對供檢樣品提供原始污染狀況的微生物檢查數(shù)據(jù)是限度檢查的基本任務(wù)藥品的第二次污染及繁殖或死亡引起的狀態(tài)改變均不能反應(yīng)藥品的微生物真實質(zhì)量。

　　3)按規(guī)定抽樣檢驗

　　由于藥品染菌的隨機(jī)性和不均勻性，欲從小量抽樣檢驗反映整批藥品的染菌狀

　　況是不可能的。由于微生物限度檢查是破壞性檢查，檢驗一瓶破壞一瓶，增加抽驗量及檢驗數(shù)量對提高檢出率無疑是有利的，但抽量過多，生產(chǎn)、經(jīng)營單位難以承受。因此藥典規(guī)定了檢驗量和數(shù)量。

　　4)適宜的供試液制備方法

　　正確制備供試液是保證檢查結(jié)果可靠的前提條件，供試液制備的基本要求是，供試品必須均勻分散于供試液中，被檢菌應(yīng)受到必要的保護(hù)。

　　5)驗證實驗及對照實驗

　　驗證的目的主要是考察供檢驗品中有無抑菌活性物質(zhì)干擾實驗、檢驗方法和培養(yǎng)條件的可行性。若在確立新藥檢驗方法及當(dāng)檢驗條件變更時，如藥品的組分、供試液制備方法或培養(yǎng)基變更等可能影響檢驗

　　結(jié)果時，須重新做驗證實驗。對一些日確立檢驗方法的品種，采用可行的供試液制備方法和固定的培養(yǎng)基，

　　在進(jìn)行常規(guī)法時可免去驗證實驗的繁瑣步驟，制作一些必要的對照實驗。通常的對照實驗有二種，一種是陰性對照，另一種是陽性對照。

　　6)嚴(yán)格無菌環(huán)境及操作

　　實驗操作應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級和局部潔凈100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系

　　統(tǒng)中進(jìn)行。進(jìn)行限度檢查時，操作人員的無菌觀念應(yīng)貫穿全過程，即在檢查過程中的每空間、每一動作、

　　任一器具未經(jīng)滅菌處理都是帶菌的，供檢樣品或接種物與之接觸都會造成污染，即使在潔凈室內(nèi)操作，仍須嚴(yán)格按照無菌程序操作，避免操作不當(dāng)?shù)奈廴驹斐蓹z驗結(jié)果錯誤。